慢性束缚应激抑郁症大鼠海马Belin1、LC3的表达变化及逍遥散的调节作用(2)
1 材料与方法1.1 材料
1.1.1 动物
SPF级雄性Wistar大鼠20只,4周龄,体质量(170±20)g。购自北京维通利华实验动物技术有限公司,动物合格证号:SCXK(京)20120001,实验在北京中医药大学屏障环境动物实验室进行[SYXK(京)20110024]。
1.1.2 试剂与仪器
试剂:PBS溶液(Solarbio),4%多聚甲醛溶液(0.1 μmol/L的PBS溶液配制,pH为7.4),AntiBeclin 1 antibody ab62557,AntiLC3A/B anti body ab58610(abcam);抗体稀释液(北京中杉金桥生物技术有限公司);羊抗兔二抗工作液(北京中杉金桥生物技术有限公司);二甲苯(北京化工厂),无水乙醇(北京化工厂)。
仪器:大鼠束缚架:自制T型束缚台:底座宽10 cm、长20 cm、厚2.8 cm,上端束缚台长22 cm,最宽处6.6 cm,前端有固定头部的小架和适合四肢放置的凹槽,上端束缚台有两条可调节的粘贴软带。显微镜Nikon E200(Nikon,Japan),正置智能型显微镜及采集系统(奥林巴斯(中国)有限公司)
1.2 方法
1.2.1 动物与分组 大鼠均在SPF级动物实验室饲养 ......
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